复合固相萃取净化-液相色谱法同时测定奶粉中的 5 种核苷酸

王川丕, 孙文闪* , 董叶箐, 钟寒辉, 郑剑峰, 俞 婕, 刘 静, 林 婷

(绿城农科检测技术有限公司, 杭州 310051)

摘 要: 目的 建立复合固相萃取净化-液相色谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中的 5 种核苷酸含量的分析方法。方法 样品用纯水涡旋提取, 10%乙酸水溶液调 pH 到 4.1, 离心将上清液全部转移到 25 mL 容量瓶中, 用纯水定容, 混匀。提取液用复合固相萃取小柱(弱阴离子交换和强阳离子交换固相萃取小柱)净化, 以磷酸盐缓冲液和甲醇为流动相, 等度洗脱, Spursil C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)色谱分离, 液相色谱-紫外检测器进行测定, 外标法定量。结果 5 种核苷酸在一定范围内(0.1~10 mg/L、0.2~20 mg/L)线性关系良好, 相关系数均大于 0.999, 定量限为 1.0、2.0 mg/kg, 检出限为 0.3、0.6 mg/kg。3 水平加标浓度(1.0、5.0、10.0 mg/kg, 2.0、10.0、 20.0 mg/kg)的回收率在 91.0%~103%之间, 精密度在 8%以内。结论 该方法具有操作简单、灵敏度高、重现性好等特点, 为奶粉中核苷酸含量测定提供一个简单准确的方法。

关键词: 液相色谱法; 复合固相萃取; 核苷酸; 奶粉