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新国标GB 5009.300-2025:食品中左旋肉碱的测定

2025-11-03

 

食品中左旋肉碱的测定

依据GB 5009.300-2025
 

左旋肉碱 (L-carnitine),又称L-肉碱或维生素BT,是一种促使脂肪转化为能量的类氨基酸,可作为一种营养强化剂添加到食品中。2025年,国家市场监督管理总局,国家卫生健康委员会发布了GB 5009.300-2025食品安全国家标准 食品中左旋肉碱的测定》。本标准代替GB 29989-2013《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》。

 

新版标准主要变化如下:扩大了方法的适用范围,增加了第二法柱前衍生-高效液相色谱法和第三法液相色谱-串联质谱法。其中第三法规定使用强阳离子交换色谱柱(3.0mm×50mm,5μm)或性能相当者,迪马科技采用Diamonsil® Plus SCX(Cat.#:99458),强阳离子交换色谱柱(3.0mm×50mm,5μm)建立了左旋肉碱的检测方法,线性范围10.0ng/mL-5000ng/mL,R2=0.999,满足国标需求。

 
 
01

样品制备

左旋肉碱标准工作液:分别吸取左旋肉碱标准储备液(20mg/mL)0.005mL、0.01mL、0.25mL、1.00mL、2.00mL、2.50mL置于10mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀,即得。该系列标准工作液质量浓度分别为10.0μg/mL、20.0μg/mL、500μg/mL、2000μg/mL、4000μg/mL、5000μg/mL。

左旋肉碱标准工作液(10.0μg/mL、20.0μg/mL)需临用现配;左旋肉碱标准工作液(500μg/mL、2000μg/mL、4000μg/mL、5000μg/mL)需4°C避光保存,有效期3个月。

 

同位素内标溶液(200μg/mL):准确称取10mg(精确至0.1mg)左旋肉碱-d3置于10mL烧杯中,加入5mL水溶解,全部转移至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀。将溶液转移至棕色容器中,4°C避光保存,有效期3个月。

 

左旋肉碱系列标准工作液:分别吸取上述各浓度的左旋肉碱标准工作液50.0μL于微波消解罐中加入50.0μL同位素内标溶液、5mL水和2.5mL,硝酸,涡旋混匀,旋紧罐盖,置微波消解仪中进行提取(10min升至120℃,保持40min,最大功率1000W)。冷却后取出,缓慢打开罐盖排气,用水稀释至25mL,混匀,用0.22μm微孔滤膜过滤,备用。吸取滤液0.50mL,加人乙腈0.50mL,混匀,供液相色谱-串联质谱仪测定。该系列标准工作液质量浓度分别为10.0ng/mL、20.0ng/mL、500ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、5000ng/mL。该系列标准工作液质量浓度分别为10.0ng/mL、20.0ng/mL、500ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、5000ng/mL。

 

02

UPLC分析条件:

色谱柱:Diamonsil® Plus SCX 3.0mm×50mm,5μm(Cat.#:99458)

进样量:1μL

柱温:40℃

流动相:A-5mmol/L甲酸铵乙腈-水溶液(含0.2%甲酸)

B-30mmol/L甲酸铵乙腈-水溶液(含0.2%甲酸)

流速:1.0mL/min

03

实验结果

图1 左旋肉碱-d3典型谱图

 

图2 左旋肉碱典型谱图

 

图3 左旋肉碱标准曲线

 

04

小结

使用我司色谱柱Diamonsil® Plus SCX 3.0mm×50mm,5μm(Cat.#:99458)分析不同浓度左旋肉碱标准溶液(10.0ng/mL-5000ng/mL),R2 = 0.999。线性范围良好,满足GB 5009.300-2025国标需求。

 
 
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