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红曲米粉中桔青霉素的测定—HPLC法解决方案

2016-09-01

红曲米粉是指以大米为原料,用红曲菌属(Monascus spp)红曲霉发酵培养制得,具有红色的颗粒或用其制成的粉末。目前红曲可分为色曲、酒曲和功能性红曲。在红曲霉的发酵过程中,同时与红曲色素相伴产生一种有害的次级代谢产物--桔青霉素。研究表明桔青霉素具有肾毒性,可致畸、致癌和诱发基因突变。桔青霉素的存在,制约了红曲在食品及药品方面的广泛应用,在一定程度上阻碍了红曲产业的发展。

目前红曲米粉中桔青霉素检测难点是净化效果差,影响目标物的定性与定量。

方法优势:

迪马科技依照国标《QB/T 2847-2007 功能性红曲米(粉)》中样品预处理方法及HPLC条件,配合使用固相萃取柱进行净化,建立了红曲米粉中桔青霉素的测定方法,该方法:

  1. 采用95%甲醇水超声提取,浓缩经混合型强阴离子交换柱净化,运用HPLC-FLD测定;

  2. 本方法定量限是10 μg/kg,回收率达90%以上,保证实验结果的准确性、重现性;

  3. 本方案具有前处理简单,回收率高,除杂效果明显、方法重现性好等优点;

  4. 适用于各省市出入境、质检、疾控、食品药品检验所、第三方检测机构、食品检测机构、大型食品生产商、高校和科研院所等。

以下为详细解决方案,敬请参考!

红曲米粉中桔青霉素的测定—HPLC法

1、适用范围

本方案适用于红曲米粉中桔青霉素的检测,方法定量限是10 μg/kg。

2、提取

  1. 1.0 g样品,加入10 mL 95%甲醇水溶液,混匀,超声10 min,间隔振荡,6000 rpm离心2 min,取上清液;

  2. 向下层残渣中加入8 mL 95%甲醇水溶液,混匀,超声10 min,间隔振荡,6000 rpm离心2 min,合并上清液;

  3. 将上清液在35 ℃水浴下减压蒸馏至剩水,加入2 mL甲醇,超声溶解,6000 rpm离心1 min,取上清液,待净化。

3、净化——ProElut PXA 60 mg/3 mL(Cat#:68303)

a活    化:

加入3 mL甲醇活化;

b上    样:

加入待净化液,弃去流出液;

c淋    洗:

加入3 mL 5%甲酸甲醇溶液,弃去流出液;

d洗    脱:

加入2 mL 0.2 M盐酸甲醇溶液,收集流出液,供HPLC分析。

4、色谱条件

色谱柱:Platisil ODS,150 x 4.6 mm,5 μm(Cat#:99501)

流  速:1.0 mL/min    进样量:20 μL   柱  温:28 ℃

检测器:FLD,Ex:331 nm;Em:500 nm

流动相:A:1% 磷酸水溶液    B:乙腈     A:B=57:43

5、添加回收结果

红曲米粉中桔青霉素的HPLC检测添加回收结果

样品

添加水平(mg/kg)

回收率(%)

红曲米粉

0.05

97.53

0.20

97.23

桔青霉素标准品(0.025 mg L)液相色谱图.jpg

桔青霉素标准品(0.025 mg/L)液相色谱图

桔青霉素标准品(0.1 mg L)液相色谱图.jpg


桔青霉素标准品(0.1 mg/L)液相色谱图

添加水平为0.05 mg/kg红曲米粉中桔青霉素检测液相色谱图

添加水平为0.20 mg/kg红曲米粉中桔青霉素检测液相色谱图

红曲米粉中桔青霉素检测(空白样品)的液相色谱图


红曲米粉中桔青霉素的测定—HPLC法相关产品信息:

货号

名称

规格

样品前处理

68303

ProElut PXA

60 mg/3 mL, 50/pk

244358

12管防交叉污染真空SPE萃取装置

12位

4803

1,3,6mL柱管通用连接器

15/pk

4806

考克(控制流量)

15/pk

99011

真空/正压两用泵,无油

1/pk

99013

抽滤瓶套装

(包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞)

1/pk

30039

FitMax针头式过滤器 Nylon

13 mm,0.22 μm 100/pk

30040

FitMax针头式过滤器 Nylon

13 mm,0.45 μm 100/pk

标准品

50D-22958-5MG

桔青霉素[518-75-2]

5   mg

色谱柱及保护柱

99501

Platisil ODS 宽pH范围型反相色谱柱

150 x 4.6 mm,5 μm

HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂

50144

甲酸  HPLC级

50 mL

50101

乙腈  HPLC级

4 L

50102

甲醇  HPLC级

4 L

50133

磷酸  HPLC级

50   mL

通用色谱产品

52401B

瓶架/蓝色(现货)

50孔

52401A

瓶架/白色(现货)

50孔

1034

样品瓶(棕色/螺纹)

2 mL, 100/pk

1035

样品瓶盖/含垫(已经组装)

100/pk

H80465

HPLC 进样针

25 μL

红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中

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