2014-01-08
苏丹红属偶氮系列化工合成染料，并非食品添加剂，主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四种类型。对于食品中苏丹红的检测，我国曾发布 GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法 国家标准。样品经溶剂提取、固相萃取净化后，用反相高效液相色谱—紫外可见光检测器进行色谱分析，采用外标法定量。
方法优势
辣椒油样品经乙腈提取后旋转蒸发至近干，正己烷溶解，然后使用ProElut SDH 苏丹红检测专用固相萃取柱进行净化，高效液相色谱法检测。该方法参考国标方法进行样品提取，净化过程使用商品化的苏丹红检测专用固相萃取柱，无需按照国标方法进行层析柱的填装和中性氧化铝的活度调整，避免了中性氧化铝活度容易受环境影响而引起苏丹红回收率不稳定的弊端，使用ProElut SDH 苏丹红专用固相萃取柱重现性和回收率结果更加稳定可靠。方法检出限满足国标GB/T 19681-2005要求最低检出限10 μg /kg。
以下为详细解决方案，敬请参考！
1、适用范围
适用于辣椒油中苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ的检测，方法检出限是10 μg /kg。
2、提取
(1) 取0.5 g样品与10 mL乙腈混合，振荡5 min，超声提取5 min，8000 rpm下离心2 min，收集上清液；
(2) 将下层残留物依次用10 mL、10 mL乙腈按照步骤(1)重复提取两次，合并三次上清液；
(3) 将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至近干，再加入5 mL正己烷混匀，待净化。
3、SPE柱净化——ProElut SDH 6 mL（Cat.#65909）
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a活 化： |
5 mL正己烷活化； |
|
b上 样： |
加入待净化液，弃去流出液； |
|
c淋 洗： |
依次加入5 mL正己烷，5 mL 1%乙酸乙酯正己烷，弃去流出液； |
|
d洗 脱： |
加入10 mL 30%乙酸乙酯正己烷，收集流出液； |
|
e重新溶解： |
将洗脱液在40 ℃下减压蒸馏近干，用40%甲基叔丁基醚正己烷溶液定容至1 mL，供HPLC分析。 |
4、色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm（Cat# 99603）
流 速：1.0 mL/min
进样量：20 μL
柱 温：40 ℃
检测器：PDA 518 nm
流动相：A：0. 2% 磷酸水溶液 B：乙腈
梯度设置
|
时间/Min. |
0 |
18 |
20 |
30 |
30.1 |
40 |
|
A（%） |
12 |
12 |
0 |
0 |
12 |
12 |
|
B（%） |
88 |
88 |
100 |
100 |
88 |
88 |
5、添加回收结果
辣椒油中苏丹红的HPLC检测添加回收结果
|
分析物 |
添加水平(mg/kg) |
回收率(%) |
|
苏丹红Ⅰ |
1.0 |
95.16 |
|
苏丹红Ⅱ |
1.0 |
91.07 |
|
苏丹红Ⅲ |
1.0 |
93.88 |
|
苏丹红Ⅳ |
1.0 |
91.83 |
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辣椒油中苏丹红染料的测定相关产品信息：
|
货号 |
名称 |
规格 |
|
样品前处理 |
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|
65909 |
苏丹红检测专用固相萃取柱
ProElut SDH |
6 mL, 30/pk |
|
244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取装置 |
12位 |
|
4803 |
1,3,6mL柱管通用连接器 |
15/pk |
|
4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
|
99011 |
真空/正压两用泵，无油 |
1/pk |
|
99013 |
抽滤瓶套装
(包括硅橡胶管 |
1/pk |
|
37177 |
针头式过滤器 Nylon |
|
|
37180 |
针头式过滤器 Nylon |
|
|
色谱柱及保护柱 |
||
|
99603 |
反相高效液相色谱柱
Diamonsil C18(2) |
250 × |
|
6201 |
EasyGuard C18 保护柱套装 |
10 × 4.0
1个柱套 + 2个柱芯 |
|
标准品 |
||
|
50P-C16986101 |
苏丹红Ⅰ[ |
250 mg |
|
50P-C16986102 |
苏丹红Ⅱ[3118-97-6] |
250 mg |
|
50P-C16986103 |
苏丹红Ⅲ[85-86-9] |
250 mg |
|
50P-C16986104 |
苏丹红Ⅳ[85-83-6] |
250 mg |
|
HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂 |
||
|
50101 |
乙腈 HPLC级 |
|
|
50115 |
正己烷 HPLC级 |
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|
50104 |
乙酸乙酯 HPLC级 |
|
|
50123 |
甲基叔丁基醚 HPLC级 |
|
|
50133 |
磷酸 HPLC级 |
50 mL |
|
通用色谱产品 |
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|
52401B |
瓶架/蓝色 |
50 孔 |
|
|
瓶架/白色 |
50孔 |
|
5323 |
样品瓶（棕色/螺纹） |
2 mL, 100/pk |
|
5325 |
样品瓶盖/含垫（已经组装） |
100/pk |
|
H80465 |
HPLC 进样针 |
25 μL |
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