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怎样选择离子对试剂
在选择离子对试剂时,烷基链的长度是必须考虑的因素,
因为碳链的长度决定了对样品的分离。碳链越长,对离子的疏水
性越强,如表1 和图1 中所示,Q12 的保留时间是Q5 的20 倍。
表1 和图1 同时也表明,Q 系列试剂的链长明显影响了苯甲酸
的保留时间,而对苯甲醇的保留时间没有影响。S 系列试剂也具
有同样的保留特性。
下面是选择离子对试剂的步骤
• 选择一支柱子,通常是端基封尾的C18 柱(Diamonsil)
• 使用色谱纯的水和试剂
• 选择获得最佳分离效果的流动相的配比
• 如果样品中含有非离子组分,在进样前需最优化样品溶液
• 选择合适的对离子,酸性化合物选用Q 系列试剂,碱性化合
物选用S 系列试剂
• 选择合适的碳链长度,使分离度达到最大(图2)
• 一旦选定离子对试剂,可以通过调整pH 值来获得最佳分离。
由于pH 值能够显著影响保留时间,所以在调整时,应该微
调,不可调整幅度太大。离子对试剂在流动相中的理想浓度通常
是0.005 M,但是也可以通过调整其浓度的大小来优化分离效果(表2)
表1.碳链长度对保留值的影响
| Q系列 | 保留时间(苯甲酸) | 保留时间(苯甲醇) | 保留比,酸/醇 |
| Q5 | 4.53 | 9.17 | 0.49 |
| Q6 | 6.50 | 8.60 | 0.76 |
| Q7 | 8.24 | 9.13 | 0.90 |
| Q8 | 12.36 | 8.94 | 1.38 |
| Q12 | 79.53 | 8.52 | 9.33 |
表2.pH值对保留值的影响
| Q6 |
PH=7.50 PH=6.50 PH=5.50 |
Rt=0.59 Rt=0.70 Rt=0.96 |
| Q7 |
PH=7.50 PH=6.51 PH=5.52 |
Rt=0.88 |
| Q8 |
PH=7.51 PH=6.54 PH=5.50 |
Rt=1.06 Rt=1.29 Rt=1.59 |
